Annales de Toxicologie Analytique, vol. XIII, n° 2, 2001

Patrick MURA1, Martine PERRIN2, Martine CHABRILLAT3, Huguette CHAUDRON4, Véronique DUMESTRE-TOULET5, Stéphanie BARC1, Gilbert PEPIN6

1 : Laboratoire de Biochimie et toxicologie, Centre Hospitalier Universitaire, BP 577, 86021, Poitiers
2 : Institut de Recherche Criminelle de la Gendarmerie Nationale, Rosny-Sous-Bois
3 : Laboratoire Interrégional des Douanes, Paris
4 : Laboratoire de Police Scientifique, Lyon
5 : Laboratoire BIOffice, Artigues-Près-Bordeaux
6 : Laboratoire Toxlab, Paris

Résumé
L'augmentation des teneurs en THC dans les produits à base de cannabis vendus en France est, depuis quelques années, fréquemment évoquée dans la littérature. Cependant, à notre connaissance, cette affirmation ne repose sur aucune base bibliographique. L'objet de la présente étude a été de vérifier la valeur de cette information.
Nous avons rassemblé 5152 résultats d'analyses obtenus de 1993 à 2000 sur des produits de saisies effectuées par les services des douanes, de la police nationale et de la gendarmerie nationale. Les renseignements fournis indiquaient l'année de la saisie, le type de produit et la teneur observée en delta-9 tétrahydrocannabinol (THC). Les analyses étaient réalisées par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse.
Les résultats indiquent que, quelle que soit l'année étudiée, une très grande variabilité des concentrations était observée pour " l'herbe " mais aussi pour la " résine ". Des concentrations en THC inférieures à 2 % étaient relativement fréquentes (18 % des échantillons). Jusqu'en 1995, 75 % des échantillons d'herbe contenaient moins de 5,5 % de THC, et la teneur la plus élevée observée dans une saisie a été de 8,7 %. Pendant la même période, 47 % des échantillons de résine contenaient entre 5 et 10 % de THC. Depuis 1996, bien que d'une façon générale les teneurs observées dans la majorité des échantillons n'aient pas beaucoup évolué (54 % des échantillons d'herbe et 71 % des échantillons de résine contenaient respectivement moins de 5 % et moins de 10 % de THC), sont apparus de façon exceptionnelle des échantillons à base de cannabis très fortement concentrés en THC. Au cours de l'année 2000, 3 % des échantillons d'herbe et 18 % des échantillons de résine analysés contenaient plus de 15 % de THC. Ces échantillons très concentrés correspondaient le plus souvent aux nouveaux produits comme la " skunk ", la " super skunk " ou le " pollen ".
En conclusion, il y a eu depuis 1996 une augmentation des teneurs en THC avec notamment l'apparition de nouveaux produits très fortement titrés, mais cette évolution n'a concerné qu'une minorité des échantillons disponibles sur le marché clandestin français.

MOTS-CLES : cannabis, delta-9 tétrahydrocannabinol, THC

Summary
The increase in the delta-9 tétrahydrocannabinol (THC) content of cannabis sold in France has been for several years frequently claimed in the literature. However, in our knowledge, this assessment has never been documented. The purpose of the present study was to check the value of this assertion. We have compiled 5152 results obtained from 1993 to 2000 on seized cannabis products by the laboratories of French customs, national police force, and from some private forensic toxicology laboratories. Each result indicated the year of the seizure, the strain of cannabis and the THC content. The analyses were performed by gas chromatography - mass spectrometry.
Whatever the year, very important variations were observed in THC contents as well for herb as for resin. THC levels lower than 2 % were relatively frequent (18 % of samples). Up to 1995, 75 % of herbal samples contained less than 5.5 % of THC, and the maximum value found in a French seizure was 8.7 %. During the same period, 47 % of resin samples contained between 5 and 10 % of THC. Since 1996, although THC levels of most of the samples have not significantly increased (54 % of herbal samples and 71 % of resin samples contained respectively less than 5 and 10 % of THC), more potent cannabis samples exceptionally appeared. During the year 2000, 3 % of herbal products and 18 % of resin samples contained more than 15 % of THC. These seizures consisted generally in new strains such as "skunk", "super skunk" or "pollen".
As a conclusion, since 1996 there has been an increase in the THC content of cannabis with the exceptional occurrence of very potent strains, but this evolution concerns only a minority of products that are available clandestinely in France.

KEY-WORDS : cannabis, delta-9 tetrahydrocannabinol, THC.

Marjorie CHEZE, François VAYSSETTE, Gilbert PEPIN
Laboratoire d'Expertises TOXLAB, 7, rue Jacques Cartier - 75018 PARIS
Tél : 01.58.59.28.00 - Fax : 01.58.59.28.01 - e-mail : labtoxlab@aol.com

RESUME
Devant la recrudescence de la consommation de drogues de synthèse telles que l'ecstasy et le LSD, le toxicologue se retrouve parfois confronté à des problèmes de sensibilité. Tel est le cas du LSD, puissant hallucinogène agissant à des doses très faibles, qui est habituellement vendu sous forme de buvards ("Acides") imprégnés à 50 µg en moyenne (de 10 à 100 µg). Les concentrations retrouvées dans les phanères sont de l'ordre du picogramme, rendant sa détection particulièrement difficile. Nous avons utilisé avec succès les colonnes LSD ImmunElute (Microgenics), récemment commercialisées en France, pour une extraction de haute spécificité associée à des techniques de détection suffisamment sensibles et spécifiques telles que la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse (CLHP-SM) et la chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse tandem (CPG-SM-SM). Nous avons utilisés ces techniques dans un cas de polytoxicomanie mise en évidence dans les poils pubiens après consommation importante de LSD et pour lequel la concentration était de 26 pg/mg. La sensibilité de la technique en CPG-SM-SM autorise la détection spécifique du LSD dans les phanères à des concentrations très basses (0,5 pg/mg).

MOTS-CLES
LSD, poils pubiens, Immunoaffinité.

SUMMARY
Growing consumption of illicit drugs such as ecstasy or LSD has confronted toxicologists with analytical sensitivity difficulties. LSD is a potent hallucinogenic compound which is active at low doses and usually sold as blotter papers (small stamps) soaked at an average of 50 µg (10-100 µg). Consecutive concentrations in hair are in the picogram range that leads to detection difficulties. We successfully used LSD ImmunElute columns recently available in France, for a high specific extraction with enough sensitive coupled to specific analytical techniques such as liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) and gas chromatography-tandem mass spectrometry (GC-MS-MS). We report a case of drug addiction as demonstrated by hair analysis with a large consumption of LSD. LSD tested positive at 26 pg/mg in pubic hair. The high sensitivity of GC-MS-MS allows the specific detection of LSD in hair at very low levels (0.5 pg/mg).

KEY-WORDS
LSD, pubic hair, Immunoaffinity.

Laurence LABAT1*, Philippe DALLET1, Marc DEVEAUX2, Jean-Pierre DUBOST1.

(1) Laboratoire de Chimie Analytique, UFR de Pharmacie, 3 place de la Victoire, 33076 Bordeaux cedex.
(2) Institut de Médecine Légale, Place Théo Varlet, 59000 Lille.

* Auteur à qui adresser la correspondance :
Laurence LABAT,
Laboratoire de Chimie Analytique, UFR de Sciences Pharmaceutiques,
3 place de la Victoire, 33076 Bordeaux cedex
Tel : 05-57-57-18-18 Fax : 05-56-94-70-90
e-mail : laurence.labat@chimana.u-bordeaux2.fr

Résumé

La mirtazapine est un antidépresseur de nouvelle génération, antagoniste des récepteurs ?2 présynaptiques d'action centrale, permettant l'augmentation de la neurotransmission noradrénergique et sérotoninergique. L'identification et le dosage dans les milieux biologiques de cette molécule et de son métabolite actif, la déméthylmirtazapine, peuvent être réalisés par chromatographie liquide haute performance (CLHP) et par électrophorèse capillaire de zone (ECZ).
La mirtazapine possède deux fonctions amine de propriétés acido-basiques très différentes. Le pKa du groupement amino-2-pyridine est de 3,60 ± 0,05, et celui de la fonction amine tertiaire, de 7,50 ± 0,05. Nous avons étudié l'incidence de ces constantes d'ionisation sur le comportement analytique de la mirtazapine parmi les antidépresseurs de nouvelle génération, dans le cadre du développement de méthodes de séparation en CLHP et en ECZ.
Nous présentons la séparation d'un mélange de 12 antidépresseurs, dont la mirtazapine et la déméthylmirtazapine, en CLHP sur une colonne Satisfaction® RP 18 AB maintenue à 45°C avec une phase mobile acétonitrile/tampon pH 4,8 (35 : 65, v/v). En ECZ, la séparation a été optimisée à 15°C sur un capillaire en silice fondue conditionné par un tampon borate 42 mM (pH 9,5) et méthanol (80 : 20, v/v) et une tension appliquée de 15 kV.
En CLHP, nous avons mis en évidence l'influence particulièrement importante du pH de la phase mobile (pH 3 à pH 4,95) et de la température (25°C à 50°C) sur les temps de rétention de la mirtazapine et de son métabolite. En ECZ, le pH du tampon de migration (entre pH 9,2 et pH 9,9) a une influence homogène sur la migration de l'ensemble des antidépresseurs, tous faiblement ionisés dans ces conditions.
Les comportements analytiques de la mirtazapine et de la déméthylmirtazapine sont donc très dépendants des variations de pH dans des zones proches des deux pKa.

Mots-clés
Mirtazapine, constante d'ionisation, CLHP, ECZ

Summary
Mirtazapine is a new antidepressant, antagonist of central ?2 presynaptic receptors, and thus increases the release of noradrenaline and serotonin. Determination in biological fluids of mirtazapine and demethylmirtazapine, the pharmacologically active metabolite, can be performed by high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary zone electrophoresis (CZE).
Mirtazapine has two amino groups with different acido-basic properties. The pKa of the amino-2-pyridine group was found to be 3.60 ± 0.05 and the pKa of the tertiary amine group, 7.50 ± 0.05. We studied the influence of these acido-basic characteristics on the analytical behaviour of mirtazapine among other new antidepressants, in developing HPLC and CZE separative technics.
We performed the separation of twelve antidepressants, including mirtazapine and demethylmirtazapine, by HPLC on a Satisfaction® RP 18 AB column at 45°C with a mobile phase composition of acetonitrile/phosphate buffer pH 4.8 (35 : 65, v/v). In CZE, we optimized the separation at 15°C on a fused silica capillary with a migration buffer consisting of borate buffer 42 mM (pH 9.5) and methanol (80 : 20, v/v), and an applied voltage of 15 kV.
In HPLC, we pointed out the major effect of the pH of the mobile phase (pH 3 to pH 4.95) and of the temperature (25°C to 50°C) on mirtazapine and demethylmirtazapine retention times. In CZE, the pH of the migration buffer (pH 9.2 to pH 9.9) has a similar and minor effect on all the antidepressant molecules migration, weakly ionized in these conditions.
In conclusion, the analytical behaviours of mirtazapine and demethylmirtazapine are very dependent of pH changes in pH zones near the two pKas.

Key-words
Mirtazapine, ionisation constant, HPLC, CZE.

Bensalem BELLIK (1), Khelifa DERGHAL (3), Jacqueline SANCHO (2), Abdelkader RHAOUI (4), Monique CAILLIEZ (2), Anne Marie DENANCE (3), François FRAÏSSE (4)

(1) Laboratoire de Biologie des Urgences, Hôpital Pitié-Salpêtrière 75013 Paris
Tél : 01 42 17 73 54 - Fax : 01 42 17
(2) Laboratoire de Biochimie-Immunologie Hôpital Delafontaine 93205 St-Denis
Tél : 01 42 35 61 40 - Fax :
(3) Urgences Médico-Chirurgicales, Hôpital Delafontaine, 93205 St-Denis
(4) Service de Réanimation Médicale, Hôpital Delafontaine, 93205 St-Denis

RESUME

La méthémoglobinémie est une urgence thérapeutique dont le pronostic vital dépend de la précocité du diagnostic et du traitement spécifique (bleu de méthylène). Nous rapportons dans cette observation un cas de méthémoglobinémie grave (51 %) secondaire à l'ingestion d'une teinture de chaussure. Deux mois plus tard on assiste à une récidive avec le même produit. L'évolution sous bleu de méthylène a été nettement meilleure à la deuxième hospitalisation (taux de méthémoglobine 16% à la 2eme heure sous 25 mL de bleu de méthylène versus 22% à la 24eme heure sous 30 mL de bleu de méthylène) en raison d'une prise en charge plus efficace et plus rapide de la malade.

Mots clés : Méthémoglobinémie, bleu de méthylène.

SUMMARY
Methemoglobinemia is a therapeutic emergency. Outcome depends on early diagnosis and specific therapy (by methylen blue). We here report a case of severe methemoglobinemia (51%) following ingestion of a shoe dye; two month later a similar episode occured. Following therapy, a more favorable course was obtained during the second hospitalization (16% after 2 hours with 25 mL methylen blue vs. 22% after 24 hours with 30 mL). A more efficient care of methemoglobinemia relies on precocity of diagnosis and specific treatment.

Key words: methemoglobinemia, methylen blue

Jean-Pierre GOULLÉ(1), Jean NOUVEAU(2), Patricia BRIQUET(3), H. DEBRIS(4), Vincent CIRIMELE(5), Pascal KINTZ(5)
(1) Laboratoire de Pharmacocinétique et de Toxicologie Clinique - Groupe Hospitalier
B.P. 24 - 76083 LE HAVRE Cedex
Tél. : 02 32 73 32 18 - Fax : 02 32 73 32 38
(2) Service de Réanimation Médicale - Groupe Hospitalier
B.P. 24 - 76083 LE HAVRE Cedex
Tél. : 02 32 73 31 90 - Fax : 02 32 73 32 41
(3) Département Accueil du Traitement des Urgences - Groupe Hospitalier
B.P. 24 - 76083 LE HAVRE Cedex
Tél. : 02 32 73 31 63 - Fax : 02 32 73 34 12
(4) Service d'Accueil Médical d'Urgence - Groupe Hospitalier
B.P. 24 - 76083 LE HAVRE Cedex
Tél. : 02 32 73 31 31
(5) Institut de Médecine Légale
11 rue Humann - 67000 STRASBOURG
Tél. : 03 90 24 33 47 - Fax : 03 90 24 33 62

Correspondance à adresser à :
Dr Jean-Pierre GOULLÉ
Laboratoire de Pharmacocinétique et de Toxicologie Cliniques
Groupe Hospitalier Jacques Monod
B.P. 24
76083 LE HAVRE
Tél : 02/32/73/32/23
Fax : 02/32/73/32/38
e-mail : jgoulle@ch-havre.fr

RÉSUMÉ
L'objectif de ce travail est de présenter deux cas d'ingestion massive de benzodiazépines (BZD) et de montrer l'extraordinaire tolérance de sujets accoutumés à la consommation de ces molécules. La première observation concerne un homme de 44 ans, en invalidité pour dépression, traité par venlafaxine et clorazépate qui ingère, suite à un différent familial 34,5 g de clorazépate. A l'arrivée aux urgences, le malade est somnolent mais réveillable. Il est admis par sécurité en réanimation malgré un score de Glasgow à 15. Il est somnolent pendant 3 jours. Il est ensuite transféré en médecine puis en psychiatrie et quitte l'hôpital le 12ème jour. Onze prélèvements sanguins sont réalisés ainsi qu'un prélèvement de cheveux. La seconde observation est celle d'une femme de 38 ans, ancienne toxicomane par voie veineuse, VIH 1 positive, qui consulte dans le cadre du traitement de son SIDA. En raison de troubles de la vigilance ainsi que de l'élocution, le médecin demande un bilan toxicologique sanguin et urinaire, orienté vers la recherche de stupéfiants. Des cheveux sont prélevés. Dans les deux cas, l'identification et le dosage des BZD plasmatiques est réalisé par CL/UV/BD et le dosage des BZD dans les cheveux par CG/SM en mode ionisation chimique négative. Pour la première observation les concentrations sanguines varient sur la période de 12 jours entre 54 et 19 mg/l pour le nordazépam et de 6,53 à 0,35 mg/l pour l'oxazépam. Les dosages dans les cheveux montrent des concentrations respectives de 6,23 et 0,95 ng/mg. Quant à la seconde observation les dosages sanguins et capillaires permettent de mettre en évidence une conduite toxicophile aux BZD : nordazépam 31,7 mg/l et 5,77 ng/mg ; diazépam 8,2 mg/l et 3,02 ng/mg ; oxazépam 3,2 mg/l et 0,67 ng/mg ; lorazépam 0,26 mg/l et 0,26 ng/mg ; lormétazépam 0,18 et 0,39 ng/mg. Ces deux observations mettent en évidence des phénomènes d'accoutumance et de tolérance chez des sujets présentant des conduites toxicophiles anciennes. Elles contrastent avec les cas décrits dans la littérature de sujets décédés d'intoxications mettant en cause uniquement une BZD, mais également avec les cas tirés de notre expérience médico-légale, pour lesquels les concentrations mesurées, admises comme étant à l'origine du décès, sont souvent nettement inférieures à celles mesurées chez ces deux malades.
Mots clés : intoxication - benzodiazépines - sang - cheveux.

SUMMARY
The purpose of this paper is to present two cases of severe intoxication with benzodiazepines (BZD) and the extraordinary individual tolerance to these drugs in accustomed subjects . The first case which we are reporting is that of a 44-year-old man, having a bad fit of depression, treated with venlafaxine and clorazepate who ingests 34.5 g of clorazepate further to a domestic quarrel. The patient was drowsy without coma, when admitted to the hospital. Despite a Glasgow's score of 15, he was admitted to the emergency unit. There, he remained sleepy for 3 days. Then he was admitted in a medical unit, later in a psychiatric unit and left the hospital after 12 days. Eleven blood samples, as well hair samples, were collected. The second case which we are reporting concerns a 38-year-old, ex-heroin-addicted woman, HIV 1 positive, who consulted for AIDS treatment. The physician collected blood, urine and hair for toxicological screening (especially drugs of abuse), because of wording and balance disorders. In both cases, BZD were assayed by HPLC/DAD in blood and by GC/MS using negative chemical ionization in hair. In the first case, blood concentrations decreased over the 12 day-period from 54 to 19 mg/l for nordazepam and from 6.53 to 0.35 mg/l for oxazepam. The respective hair concentrations were 6,23 and 0,95 ng/mg. In the second case, blood and hair determination proved the addiction to BZD : nordazepam 31.7 mg/l and 5.77 ng/mg ; diazepam 8.2 mg/l and 3.02 ng/mg ; oxazepam 3.2 mg/l and 0.67 ng/mg ; lorazepam 0.26 mg/l and 0.26 ng/mg ; lormetazepam 0.18 and 0.39 ng/mg. These results clearly demonstrate the extraordinary tolerance to BZD in subjects used to these drugs. These cases contrast with those previously published concerning subjects who died from BZD poisoning alone, but also with our forensic cases, in which so-called 'fatal' blood levels are often lower than those measured in these two patients.
Key words : Intoxication - benzodiazepins - blood - hair analysis.

GINOLHAC Sophie, MOULSMA Mustapha, LARDET Gisèle, VALLON Jean-Jacques=.
Laboratoire de pharmacotoxicologie et analyses de traces, hôpital Edouard Herriot, place d'Arsonval, Lyon.

Sophie Ginolhac
Centre international de recherche sur le cancer
150 cours Albert Thomas
69372 LYON cedex 08
Téléphone: 04-72-73-83-64
Télécopie: 04-72-73-83-22

RESUME
Les auteurs proposent une méthode de dépistage toxicologique large de xénobiotiques médicamenteux dans le sérum faisant appel à une étape préanalytique nécessaire à une séparation par chromatographie liquide haute performance (HPLC) et une détection UV à barettes de diode. Cette méthode permet la détection et la quantification de nombreuses molécules de polarité variée.
Trois types d ' extraction sont comparées : extraction liquide-liquide, extraction solide-liquide sur colonne de silice (BOND ELUT CERTIFYÒ) et extraction solide-liquide sur colonne de copolymère (OASISÒ MCX), afin d'évaluer la meilleure technique pour l'objectif recherché. L'analyse chromatographique est réalisée sur HPLC/DAD, HP1100 équipé d'une colonne hypersil BDS C18, 3X125 mm. La phase mobile est un tampon phosphate 0,1M pH 5,6.
L'extraction sur colonne OASISÒ MCX donne, en moyenne, pour l'ensemble des molécules analysées, les rendements d'extraction les plus importants avec une bonne répétabilité. Seuls les anti-inflammatoires non stéroïdiens sont mal extraits par cette technique mais leurs concentrations thérapeutiques étant importantes, leur détection est possible. Outre ses bons rendements, la colonne OASISÒ MCX permet une extraction plus rapide, une moindre utilisation de solvant et de sérum que les autres techniques.
Cette colonne est donc bien adaptée aux dépistages toxicologiques larges à partir de sérum.
Mot-clés : dépistage toxicologique, extraction phase solide

SUMMARY
The authors propose a broad screening method of toxic molecules in blood comprising a serum extraction, a high phase liquid chromatographic separation (HPLC) and an UV diode array detection. This method estimates the quantity of differents molecular compounds of varied polarity.
Three extractions methods were compared: liquid-liquid extraction, solid-phase extraction on silica columns (BOND ELUT CERTIFYÒ) and solid-phase extraction on copolymer columns (OASISÒ MCX). The chromatographic analysis was carried out on a HPLC/DAD HP1100 analyser with a hypersil BDS column C18 3X125 mm and the mobile phase was phosphate buffer 0,1M pH 5,6.
The column OASISÒ MCX generally gave the best results and was the most reliable. However, the non steroïdal anti-inflammatory drugs were poorly extracted with this column but as their therapeutic concentrations are high, their detection was still possible. In addition to its good resolution, the column OASISÒ MCX allows a faster extraction, and uses less solvent and serum than the other techniques. This column is thus well adapted to broad toxicological screening starting from serum.

Key-words : toxicological screening, solid phase extraction

Bernard CARTIGNY(1), Nathalie AZAROUAL(2), Michel IMBENOTTE(3), Nicole HOUDRET(1), Henri MALANDAIN(4), Gaston VERMEERSCH(2), Michel LHERMITTE(1,3)

(1) Laboratoire de Biochimie et Biologie Moléculaire, Hôpital Calmette, 59045 Lille Cedex. (2) Laboratoire d' Application RMN Université Lille 2,
(3) Laboratoire de Toxicologie, Faculté des Sciences Pharmaceutiques et Biologiques, avenue du Pr Laguesse, BP 83, 59006 Lille Cedex.
(4) Laboratoire de Biochimie, Centre Hospitalier, BP 555, 56017 Vannes. France.
Auteur à qui adresser la correspondance :
M. Imbenotte, Laboratoire de Toxicologie, Faculté des Sciences Pharmaceutiques et Biologiques, avenue du Pr Laguesse, BP 83, 59006 Lille Cedex. Tél 33-3-20.96.40.40. E-mail : mimbenot@phare.univ-lille2.fr

RESUME
L'absorption massive volontaire ou accidentelle d'alcools ou de glycols demande une prise en charge thérapeutique rapide et bien adaptée. Dans la plupart des cas, le diagnostic à l'hospitalisation fait appel à des signes cliniques et biologiques. Le dosage plasmatique simultané du méthanol et de l'éthylène glycol est aussi réalisable mais il est exceptionnel de mesurer deux métabolites toxiques intéressants : l'acide formique, métabolite du méthanol, et l'acide glycolique, pour l'éthylène glycol. Or, l'intérêt diagnostique de ces deux paramètres est essentiel, en particulier lorsque l'intoxication est découverte tardivement.
Par spectroscopie RMN 1H, les anions formiate et glycolate présentent deux singulets caractéristiques à 8,44 et 3,93 ppm, correspondant respectivement à leurs groupements fonctionnels méthine et méthylène. Dans ce travail, nous présentons la validation de la quantification du formiate et du glycolate par RMN 1H. La linéarité (de 0 à 40 mmol/l) et la répétabilité (c.v. = 6,7 %) ont été déterminées. Puis l'analyse a porté sur 40 échantillons de sérum supplémentés. Des composés potentiellement interférents (alcools, diols, polyols, acides), ajoutés aux sérums, n'ont pas perturbé la quantification. L'apport de la RMN 1H à ce type de diagnostic est discuté.
Mots-clefs : formiate, glycolate, RMN 1H, sérum, méthanol, éthylène glycol, intoxication.

SUMMARY
Massive ingestion (intentional or accidental) of alcohols or glycols needs a care protocol which is both rapid and convenient. In most cases, diagnosis on admission relies on clinical and biological parameters. Determination of methanol and ethylene glycol plasma concentrations is also possible but analysis of the two metabolites, formic acid for methanol and glycolic acid for ethylene glycol, is quite exceptional. In fact, the use of these two compounds is essential in late diagnosis.
By 1H NMR spectroscopy, formiate and glycolate are identified by their singlet at 8.44 and 3.93 ppm, corresponding to their methine and methylene groups respectively. The validation step of 1H NMR spectroscopy consisted of the study of linearity (from 0 to 40 mmol/l), and repeatability (c.v. = 6.7 %) of the signals. Quantitation was tested on 40 spiked serum samples. Moreover, compounds with chemically related structures (alcohols, diols, polyols, acids) were added to the sera without any interference. The contribution of 1H NMR spectroscopy to diagnosis is discussed.
Key-words : formate, glycolate, 1H NMR, serum, methanol, ethylene glycol, poisoning.