Screening de 21 amphétamines dans l'urine par micro-extraction en phase solide (SPME) et chromatographie en phase gazeuse spectrométrie de masse (CPG-SM)
Screening of 21 amphetamines in urine, using solid-phase microextraction (SPME) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)
C. BATTU, P. MARQUET, A. L. FAUCONNET, H. LOTFI, G. LACHATRE

RÉSUMÉ

Une méthode de screening de 21 amphétamines et analogues dans l'urine est présentée. Des extraits très propres ont été obtenus en une seule étape par micro-extraction en phase solide, en utilisant une fibre de silice recouverte d'une phase de 100µm d'épaisseur de polydiméthylsiloxane, exposée dans l'espace de tête d'un flacon serti contenant l'échantillon. Une excellente séparation chromatographique des amphétamines, non dérivées, a été possible grâce à une colonne capillaire apolaire Supelco PTA5,30 m x 0,32 mm d.i.,0,5µm d'épaisseur de phase, spécialement traitée pour les composés aminés. Après impact électronique, I'acquisition en mode fragmentométrique de 3 ions par analyse et d'un pour chacun des 3 étalons internes deutérés a permis d'obtenir une bonne sélectivité et des limites de détection entre 1 et 50ng/ml pour les différentes analyses. Tout résultat positif obtenu par une technique irnmunochimique peut donc êtrevérifié par 1a méthode proposée. Celle-ci es tlinéaire dans une gamme étroite de concentration (de la limite de détection jusqu'à 500 ng/ml) lorsque les 21 composés et les 3 E.I. sont extraits et analysés ensemble, mais cette linéarité s'étend jusqu'à 2000 ng/ml lorsque les molécules sont analysées individuellement. La répétabilité était médiocre pour certaines analyses, mais peut être améliorée pour un contrôle strict du temps d'extraction, par exemple en automatisant la technique à l'aide d'un passeur d'échantillons disponible dans le commerce.

SUMMARY

A screening procedure for 21 amphetamine-related compounds in urine is presented. Very clean extracts were obtained in one step by solid-phase microextraction (SPME), using silica fibers coated with a 100 µm polydimethylsiloxane stationary phase, exposed in the headspace of a tightly closed vial containing the sample. An excellent chromatographic separation of the underivatized analyses was obtained with a nonpolar Supelco PTA 5,30 m x 0.32 mm i.d., 0.5µm film thickness capillary columa specially treated for amino-compounds. Selected ion monitoring of three fragments per analyse and one for each of the three deuterated internal standards elicited a high selectivity and limite of detection (LOD) between 1 and 50 ng/ml. Thus, any positive result obtained with an immunochemical assay can be verified by this technique. It was linear in a narrow range (from LOD up to 500 ng/ml) when the amphetamines were assayed together, but showed a good linearity up to 2000 ng/ml when the molecules were analyzed individually Repetability was not satisfactory for some compounds, but could be improved by a strict control of extraction time, for example by automating the whole procedure using a commercially available autosampler.