Identification et dosage des opiacés dans les milieux biologiques par chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem

Identification and determination of opiates in biological fluids by liquid chromatography - tandem mass spectrometry

A. CAILLEUX*, A. LE BOUIL, A. TURCANT, P. ALLAIN

Laboratoire de Pharmacologie Toxicologie, CHU, 4, rue Larrey - 49033 ANGERS Cedex

*Auteur à qui adresser la correspondance : Annie CAILLEUX, Laboratoire de Pharmacologie Toxicologie, CHU, 4, -rue Larrey - 49033 ANGERS - FRANCE - Tél. : 33 (0)2 41 35 45 53 - Fax : 33 (0)2 41 35 48 77

RÉSUMÉ

Ce travail décrit une méthode rapide et spécifique permettant d'identifier et de doser les opiacés dans les milieux biologiques. La chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de niasse en tandem est une méthode qui par sa spécificité et sa sensibilité permet de s'affranchir des étapes de purification et de dérivation. La méthode proposée consiste en une extraction liquide-liquide suivie de l'injection de l'extrait. La séparation chromatographique dure 5 minutes et est adamée aux analyses de routine d'un laboratoire de toxicologie. La méthode est linéaire de 10 à 1000 µg/l La répétabilité, la reproductibilité et la justesse ont été déterminées sur 6 échantillons à des concentrations de 25, 100 et 1000 µg/l. Des CV inférieurs à 15 % sont obtenus pour tous les opiacés lors de l'analyse de la fidélité Des taux de récupération compris entre 85 et 115 % ont été mesurés.

MOTS-CLÉS : Opiacés, LC-ESI-MS-MS.

SUMMARY

A sensitive and specific method for the determination of opiates in urine and plasma is described. Liquid chroniatography - electrospray ionization - tandem niass spectronietty using the multiple reaction monitoring (MRM) acquisition mode is a method which, due to its specificity and sensitivity, rentiers the stages of purification and derivation superfluous. The present technique consists of a simple liquid-liquid extraction Jollowed by a direct injection of the extracts. Chromatographic analysis takes less than 5 min and was verified to be linear from 10 to 1000 ug/l. Repeatability and reproducibility of results were each tested on 6 saniples ivith concentrations of 25, 100 and 1 000 µg/l and yielded precision CV lower than 15 % and recoveries between 85 and 115 %.

KEY-WORDS : Opiates, LC-ESI-MS-MS.