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Consensus sur l'analyse
des substances organiques dans les cheveux
Hair analysis of organic substances : general agreement
J.-P. GOULLE, P. KINTZ, P. LAFARGUE, G.
LARDET, R. MOLINARO, G. PEPIN et J. TOURNEAU
Commission "Cheveu'' S.F.T.A.
Coordonnateur P. KINTZ*
Institut de Médecine Légale - Faculté de Médecine de
Strasbourg - 11, rue Humann 67085 Strasbourg (France)
* Auteur à qui adresser les demandes de tirés à part
L'analyse toxicologique à partir d'échantillons de cheveux permet d'obtenir une information
à long terme (plusieurs semaines à plusieurs mois) sur la
consommation ou l'exposition d'un individu à des xénobiotiques.
En cela, cette méthode s'oppose aux analyses urinaires dont la
durée de détection est généralement de 2 ou 3 jours.
Dans la pratique, ces 2
techniques s'avèrent plutôt complémentaires, l'urine étant le
prélèvement de choix pou rétablir une consommation récente et
les cheveux une consommation répétée ou chronique.
Par ailleurs, les cheveux
permettent une évaluation de la sévérité de l'imprégnation
(faible, moyen ou grand consommateur).
Par analyse segmentaire
(découpage d'une mèche en segments de 2 cm) il est possible
d'établir le profil de la consommation de substances
stupéfiantes, médicamenteuses ou toxiques et de suivre son
évolution (constante,en diminution, en augmentation).
De très nombreuses applications
ont ainsi été décrites: infraction à la législation sur les
stupéfiants, contrôle du sevrage, profil de toxicomanie,
exposition in utero, compliance thérapeutique, exposition
passive, archéologie, exposition professionnelle, dépistage à
l'embauche...
Depuis 1979 et le premier rapport
de Baumgartner (J. Nuclear. Med., 1979, 20, 748) plus de 150
travaux ont été publiés à ce jour sur ce sujet.
La "Society of Forensic
Toxicologists (SOFT)" société savante américaine a
publié en 1990 et en 1992 deux textes de consensus sur
l'utilisation et l'interprétation des analyses à partir des
cheveux. Cette société est tout à fait favorable à la
technique dans l'environnement médico-légal et clinique, mais a
émis les plus grandes réserves pour son emploi en médecine du
travail et en particulier lors du dépistage à l'embauche. Les
deux rapports concluaient avec l'urgente nécessité de travaux
de pharmacologie permettant d'expliquer les mécanismes
d'incorporation des toxiques dans les cheveux. (Consensus opinion
summarizing the current applicability of hair analysis to testing
for drugs of abuse, September 1990, ToxTalk 14, 3 and Revised
consensus opinion on applicability of hair analysis for drugs of
abuse, October 15, 1992, ToxTalk, 16, 4).
Fin 1992, a eu lieu à Gènes, en
Italie, le premier congrès intemational consacré à ce sujet.
Plus de 80 experts américains, japonais et européens ont
présenté à cette occasion leurs travaux. Si les Japonais ont
surtout mis l'accent sur des études expérimentales, il s'avère
que les Américains et les Européens n'ont pas la même approche
ni les mêmes besoins analytiques. Les premiers ont développé
des techniques très sophistiquées de décontamination en vue d'une
utilisation en médecine du travail et sont préoccupés par la
cocaine et la phencyclidine, tandis que les seconds sont surtout
confrontés à l'héroine et aux procédures analytiques où le
couplage chromatographie en phase gazeuse - spectrométrie de
masse n'est pas toujours employé.Un second congrès doit se
tenir du 6 au 8 juin 1994 au même endroit.
Plus récemment, en mai 1993, à
Washington, sous l'égide du National Institute of Standards and
Technologies, un groupe restreint d'experts a proposé que l'on
fixe le seuil de positivité pour une consommation d'héroine ou
de cocaine, de 6-monoacétylmorphine ou de cocaine à 1 ng/mg
Dans ces conditions, puisqu'il s'agit
d'une technique largement validée sur le plan international, il
semble que la Société Française de Toxicologie Analytique,
instance regroupant pharmaciens, médecins et scientifiques de
toutes origines travaillant dans le même domaine se prononce sur
son applicabilité tant en médecine légale qu'en clinique,
d'autant que des expertises judiciaires ont déjà été
demandées par des juges informés.
Cela implique une charte de
qualité identique à celle mise en place pour les urines.
Chaque laboratoire pratiquant les
analyses à partir d'échantillons de cheveux doit avoir une méthodologie complètement
validée, incluant précision, justesse, sensibilité et
spécificité. La nature de la procédure de décontamination
indispensable doit toujours être mentionnée. Le rendu d'un
résultat obtenu par immunoanalyse, sans confirmation,est
inacceptable.
Tous les échantillons présumés
positifs doivent être confirmés par une seconde et
indépendante méthode. Dans la pratique, seule la GC/MS
présente suffisamment de spécificité et de sensibilité pour
être retenue.
La procédure complète est
annexée au présent document.
Dans ces conditions, l'analyse
toxicologique à partir d'échantillons de cheveux présente les
mêmes garanties que l'analyse urinaire. Elle peut donc être
utilisée comme moyen d'investigation complémentoire.
Analyse des opiacés et de
la cocaïne dans les cheveux
A. DÉCONTAMINATION
Lavage 2 fois 5 minutes au dichlorométhane.
B. HOMOGENÉISATION
Pulvérisation d'environ 100 mg de cheveux
dans un broyeur à boulet.
C. HYDROLYSE
Incubation dans 1 ml 0.1 N HCI d'environ 50 mg de
poudre pendant 12 heures à 56°C en présence de
200 ng de standards deutérés (MOR, COD, 6-MAM,
COC, BZE, EME, CE).
D. EXTRACTION
Neutralisation par 1 ml 0.1 N NaOH
Addition de 1 ml tampon phosphate saturé pH 8,4
+ 10 ml chloroforme-isopropanol-n-heptane (50:
17: 33, v/v)
Agitation, centrifugation, recueil phase
organique
Addition 5 ml 0.2N HCI
Agitation, centrifugation, recueil phase aqueuse.
Addition 1 ml 1 N NaOH + 1 ml tampon pH 8,4 + 5
ml chloroforme
Agitation, centrifugation, recueil phase
organique, évaporation
Dérivation 25 µl BSTFA + 1% TMCS
E. CHROMATOGRAPHIE
HP 5972, HP 5890, HP 7673
Colonne HP 5 MS, 30 m, splitless, 10 psi Hélium
N 55
Four 60 ° C 1 min, 30 ° C/min, 295 ° C 8 min.
RT élution EME, COC, CE, BZE, COD, MOR, 6-MAM
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